支原体检测有支原体培养和血清学检查，支原体培养和血清学检查对支原体感染有确诊依据。支原体培养较为困难，需要特殊培养且生长缓慢，所以临床上很少使用支原体培养。

血清学在肺炎支原体感染实验室诊断中具有重要的意义。尤其是在不能进行培养和PCR尚未常规应用于临床检验项目的情况下。

临床上血清学常用的方法包括：补体结合试验、间接荧光法、颗粒凝胶法、酶免疫吸附实验。这些检查可用于检查肺炎支原体IgG、IgM、IgA，从而临床上作为支原体感染的依据。