因检查的目的不同，所以性激素六项的检查时间的要求有所不同。

如果是了解基础的性激素分泌，建议在月经来潮的第2~4天进行。因为女性的月经周期可以分为卵泡期和黄体期。不同时期的激素分泌有所不同，其正常值范围也有较大的差异。

如果是考虑黄体功能不足，应该在月经来潮后的第21~23天之间进行检测，了解孕激素的水平。

如果是检查雄激素和泌乳素在月经周期的任何时间都可以采血。但泌乳素水平受到昼夜节律的影响，一般建议在上午10点钟进行采血较为合适，并且采血前最好静坐一段时间，要避免情绪过于激动。