维生素D中毒实验室检查有血清25羟D增高，血钙升高，大于3.0毫摩尔每升，12毫克每分米，血磷及碱性磷酸酶正常或稍低，血浆胆固醇正常或升高，少数病例尿素氮升高，肾功能异常，如尿比重低且固定、尿蛋白阳性、细胞增多有管型等。

干骺端硬化带是维生素D中毒，常见X线征象之一，但并非是特征性表现。还有肝功能检查、心电图、心脏彩超、肾脏彩超，因为严重中毒者尚可见肾、血管、心脏及四肢软组织有转移性钙化。