病毒性睾丸炎急性发作时，呈现全身中毒症状，如寒战、高热，也可以出现呕吐、腹痛等。全身症状轻者仅有不适，重者痛如刀割、阴囊红肿、附睾及精索伴发急性炎症，可有鞘膜积液。

阴囊检查可见睾丸肿大、触痛、阴囊皮肤明显水肿，伴发附睾及精索炎者、附睾肿大与睾丸界限不清、精索增粗、变硬。

同时，可见腮腺肿大，由于腮腺炎病毒，需经血流到达各腺体或中枢神经系统。因此，睾丸炎也可出现在腮腺肿大之前。