打破伤风针的最佳时间是受伤后24小时内，但即使超过24小时，在未发病前注射破伤风针仍有预防作用。
破伤风是由破伤风梭菌经由皮肤或黏膜伤口侵入人体，在缺氧环境下生长繁殖，产生毒素而引起肌痉挛的一种特异性感染。破伤风梭菌感染人体后有一定的潜伏期，通常为7-8天，可短至24小时或长达数月、数年。潜伏期越短者，预后越差。在受伤后的24小时内打破伤风针，可以让机体快速产生抗体，在破伤风梭菌还未大量繁殖并释放毒素之前将其消灭，从而有效预防破伤风的发生。如果因为某些原因未能在24小时内注射，也不应放弃注射。因为在破伤风发病前，只要体内还没有足够量的破伤风毒素，注射破伤风针就有助于机体产生抗体对抗可能存在的破伤风梭菌，降低发病的风险。例如，有些患者受伤后未能及时就医，在受伤后48小时甚至72小时才到医院，这种情况下医生也会根据伤口情况评估后进行破伤风针的注射。同时，对于伤口较深、污染较重如被泥土、铁锈等污染的患者，无论受伤多久，都应积极考虑注射破伤风针。
