测孕纸并非必须使用晨尿，但晨尿的检测结果通常更为准确。因为晨尿经过一夜的浓缩，尿液中的人绒毛膜促性腺激素hCG浓度较高，更容易被检测到。如果怀孕时间较短，hCG水平较低，使用晨尿可以提高检测的灵敏度。如果怀孕时间较长，hCG水平已经较高，其他时间的尿液同样可以检测出怀孕。
测孕纸的工作原理是通过检测尿液中的hCG激素来判断是否怀孕。hCG在受精卵着床后开始分泌，并随着孕期进展逐渐升高。晨尿由于浓缩作用，hCG含量相对较高，因此推荐在怀孕早期使用晨尿检测。如果错过晨尿，可以选择憋尿3-4小时后的尿液，也能达到较好的检测效果。大量饮水会稀释尿液中的hCG浓度，可能导致假阴性结果。检测前应避免过量饮水，以确保尿液中的hCG浓度足够被检测到。
使用测孕纸时，需严格按照说明书操作，避免因操作不当影响结果准确性。检测时应使用清洁容器收集尿液，避免污染。将试纸浸入尿液的深度和时间需符合要求，过长或过短均可能导致误差。读取结果时需在规定时间内观察，过早或过晚均可能影响判断。若检测结果为阴性但仍怀疑怀孕，可间隔几天后再次检测，或就医进行血液hCG检测以获得更准确的结果。某些疾病或药物可能干扰hCG水平，导致假阳性或假阴性结果，需结合其他临床检查综合判断。
